病毒采样管怎样使用?

灭活型病毒保存液

常用的病毒保存液分为两种,一种是灭活型的,一种是非灭活型的,非灭活型病毒保存液常因病毒带有传染性,对操作环境及人员要求非常高,一旦标本污染,则造成不可预估的后果,在常规的病毒核酸检测中,若检测环境达不到要求,则建议使用灭活型的病毒保存液。

灭活保存液采用高浓度的胍盐可以快速对呼吸道病原体进行灭活、保存,使样品失去感染性。已灭活的样本可使用病毒DNA/RNA提取试剂盒,核酸提取仪快速提取核酸,同时配合呼吸道病原体检测试剂盒实现快速检测,特异性灵敏度均不受影响。

灭活型病毒擦采样管的特点:

①、操作使用简单,无需配液,体系内含有高效病毒裂解液,采样后即刻灭活病毒,有效防止二次感染风险,保障运输及检测人员安全;

②、病毒DNA/RNA可在常温保存与运输1周不降解,按大多数商业化试剂盒进行提取后,获得的DNA/RNA质量好,得率高,可完成各种基因检测及分析实验,同时节省运输成本;

③、内含核酸RNA酶抑制剂,最大化程度保护病毒核酸稳定不被降解,大幅提高核酸提取效率;

④、适用于新冠病毒、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采集保存运输工作,可采集咽拭子鼻拭子或特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床试验。

华晨阳科技有限公司可提供灭活型及非灭活型的病毒采样管,以供国内各机构或企业应对核酸检测的需求。

核酸的提取及裂解离不开病毒保存液

作为一切分子生物学研究的基础,核酸的提取是开展一项研究的第一步,提取核酸的质量高低是下游分子生物学实验成败的关键。下文将会详细介绍关于DNA提取的相关信息,包括DNA提取的原理、核酸提取纯化原则和要求等。

首先介绍下DNA提取的基本原理:

DNA的提取可以简单的分为裂解和纯化两大步骤,裂解是破坏样品细胞结构,从而使样品中的DNA游离在裂解体系中的过程,纯化则是使DNA与裂解体系中的其他成分,如蛋白质、盐及其他杂质彻底分离的过程,纯化则是使DNA与裂解体系中的其他成分,如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。

裂解过程当然离不开裂解液,常规的裂解液都含有去污剂和盐。这些去污剂的作用是使蛋白质变性;破坏膜结构;去除与核酸相互作用的蛋白质。裂解液中还会加入一些生物缓冲剂,可以提供合适的裂解环境,如Tris裂解体系中还可以加入蛋白酶,利用蛋白酶将蛋白质消化成小的片段,促进DNA与蛋白质的分离,同时,也便于后续的纯化操作。

核酸分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),其中RNA又可以根据功能的不同分为核糖体RNA(rRNA),信使RNA(mRNA)和转移RNA(tRNA)。DNA主要集中在细胞核内,线粒体和叶绿体中,而RNA主要分布在细胞质当中。

不管是裂解还是提取核酸,都离不开一个最重要的东西,那就是病毒保存液,华晨阳科技研发的灭活型病毒保存液是具有裂解功能的样本保存液,样本保存及裂解一步完成,不需要另外再加入裂解液,避免了病毒样本的进一步稀释,可以在病毒核酸提取过程中增加样本投入量,提高后续检测灵敏度。

病毒采样管怎样使用?

使用病毒采样管需要注意什么问题?

春节临近,很多人都回家了,今年和往年不同的是回家需要做核酸检测,那核酸病毒采样管到底有哪些需要注意的事项?

①、这是一个经常说的问题了,产品过期或者包装破损或者是漏液是不能使用的,而且在第一时间内联系厂商或者是经销商;

②、病毒采样管例的溶液不可以直接接触到被采样者的采样部位,禁止用来泡浸拭子后对被采样者进行采样;

③、病毒采样管仅用于病毒类样本的采样,禁止用于细菌样本的采样,病毒保存液本身所含抗生素对细菌有抑制作用;

④、采集病毒样本应该严格按照采样要求和流程进行,做到采样部位准确,采样力度均衡适合,否则会影响到病毒分离阳性率;

⑤、使用病毒采样管采样应尽快送检,采样后可置常温(5~35℃)保存短期放置。如需长期放置应置于-80℃以下的低温条件。(注意:H1N1流感病毒颗粒对于-20℃比较敏感,需要低于-20℃进行保存,如采样后不立即送检或者是低温保存,会影响病毒后期的分离阳性率。)

病毒采样管的检验原理:

病毒是一种由核酸分子和蛋白质构成或者是仅由蛋白质构成的,是一种个体微小、结构简单的微生物。由于没有细胞结构,病毒自身不能复制,而是将基因侵入宿主细胞内,借助后者的复制系统新的病毒。病毒样本采集后,为了维持病毒样本的活性、延长样本中病毒存活时间,会将采样拭子放入病毒采样管中进行保存和运输。

病毒保存液的检验原理:

①、是由多种抗生素联合,具有广谱抗细菌和真菌的作用;

②、牛血轻白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂,可在病毒的蛋白外壳形成一种保护膜,使其不易分解,保证病毒的完整性;

③、Hank’s缓冲剂构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时间和感染稳定性;

④、苯酚红为酸碱指示剂,变色区域为6.6(黄)-8.0(红),在7.2-7.4时呈红色。而病毒外层蛋白最稳定的pH值为7.2-7.4,这也是Hank’s缓冲液的pH值范围。如果污染的霉菌或细菌未被抗生素抑制,其会大量繁殖,释放二氧化碳使pH值下降。当pH值低于7.2-7.4,病毒外层蛋白未定性下降,会加速分解,此时采样液的外观会由红色变成黄色。

 

 

 

那些含有新冠病毒的检测样本最后都怎么处理了

医疗废物在医疗机构内的处理流程主要分为:分类收集、高压灭菌处理、院内转运、暂时贮存、转交集中处置。要从病原学上确定新冠肺炎疑似患者是否感染新冠病毒,并对患者病情进行评估,需要用核酸检测原料病毒保存液采集样本进行检测。所检测样本包括鼻咽拭子、痰、血液、尿液等。

在完成检测后,检测人员会先对这些标本进行高压灭菌

新冠肺炎疫情爆发后,北京佑安医院作为定点收治医院,收治确诊及疑似病例患者。该院临床检验中心主任赵艳研究员接受科技日报记者采访时表示:“检验人员完成样本检测后,产生的医疗废弃物主要为检测后标本、检测过程中产生的实验废弃物(如固体废弃物样本容器、加样枪头等),以及在检验设备在实验过程中所产生的的废液。所产生的的这些医疗废物,按照《医疗废物分类目录》,属于感染性医疗废物。”

按照《医疗废物管理条例》及相关规定,对于医疗废物中可能含有病原体的标本、耗材、实验废液等高危险废物,实验室检测人员需要在实验室就地进行压力蒸汽灭菌或者化学消毒处理。对检测后标本、检测过程中与标本接触的废弃耗材,采用压力蒸汽灭菌。至于感染性废液,需要用有效氯含量0.55%消毒剂浸泡,并验证灭菌效果后,排入实验室水处理系统。

“需要注意的是,压力蒸汽灭菌并不适用所有的医疗废弃物。压力蒸汽灭菌主要适用于处理感染性废物和损伤性废物,不适用于病理性废物、化学性废物和药物性废弃物。”赵艳谈到。

对标本消毒后要做好登记,集中储存

河南省卫生厅临床检验中心、郑州大学第一附属医院检验科发布《新型冠状病毒标本实验室检测及生物安全处理程序》(一下简称《处理程序》),其中提到,医疗废物专用包装袋、利器盒的外表面应当有警示标识,在盛装医疗废物前,应当进行认真检查,确保其无破损、无渗漏。

而医疗废物的收集桶应为带盖脚踏式。每个包装袋、利器盒应当系有或粘贴中文标签,标签内容包括:医疗废物产生单位、产生部门、产生日期、类别,并在特别说明中标注“新型冠状病毒感染的肺炎”。

另外,检验人员要严格对压力蒸汽灭菌处理后的医疗废物进行登记。据悉,登记内容包括医疗废物的来源、种类、重量或者数量、并进行集中处置。

最后为防止病毒泄露,确保生物安全,采取相应的安全保卫措施

对病毒样本的规范处理涉及到生物安全。历史上曾出现过因实验室管理不当,导致病毒泄露造成人员感染的事件。根据我国有关规定,新冠病毒属于高致病性病原微生物界定范畴。《条例》第三十三条明确指出,从事高致病性病原微生物相关实验活动的实验室的设立单位,应当建立健全安全保卫制度,采取安全保卫措施,严防高致病性原微生物被盗、被抢、丢失、泄漏,保障实验室及其病原微生物的安全。

如果病原微生物实验室发生高致病性病原微生物泄漏,实验室工作人员应立即采取控制措施,防止高致病性病原微生物扩散,并同时向负责实验室感染控制工作的机构或者人员报告。

 

病毒采样管里面的液体有什么功能?

如何正确选择病毒采样管保存液?

如何正确选择病毒采样管保存液?

当前新型冠状病毒防控仍然十分严峻。作为核酸检测的第一步,样本采集和保存的重要性毋庸置疑,有很长一段时间市场上的病毒保存液几乎都是直接保存活病毒,其实也就是给灭活型的病毒保存液,导致采样、运输和检测中的医护人员均面临较高的感染风险,针对这些情况,抗疫一线非常需要能直接灭活病毒的样本保存液,这样可以大大提高了样本采集、运输过程中的安全性。

但应该注意的是,在灭活病毒的同时,保存液还应考虑能否稳定保存病毒核酸的完整性,避免样本中的核酸在检测前降解,造成核酸检测“假阴性”。本文对比了市面上病毒保存液和我公司研制的病毒保存液,让我们一起来看看他们的保存效果究竟怎样。

华晨阳的病毒采样管

我们研发部的博士专家分别用其他公司和我们自己的生产研发的病毒采样管在常温条件下保存RNA病毒。

结果显示,保存1~7天后,我们的灭活型病毒保存液保存的病毒核酸,CT值未见明显变化,说明病毒核酸稳定存在,未降解,而其他公司保存液保存的病毒核酸CT值则随着天数的增加而有明显增加,保存效果明显弱于我们的保存液。从病毒RNA的保存效率上看,同样都是37℃的条件,保存1~7天后,使用我司的保存液,病毒核酸保存效率基本恒定在100%。

深圳市华晨阳科技有限公司独家研制的灭活型病毒保存液,含有特殊的蛋白变性剂和核酸稳定剂,蛋白变性剂可以迅速破坏病毒外壳蛋白质的二级结构,将病毒灭活,核酸稳定剂可以常温稳定保存病毒核酸不降解,可以在37℃条件下稳定保存7天,非常利于当前新冠病毒核酸检测的样本保存。

病毒采样管里面的液体有什么功能?

病毒保存液对假阴性的影响

病毒保存液对假阴性的影响

病毒采样管是采样管内衣中病毒样本保护性运输介质,防止病毒采样管后不能及时检测在送检过程中病毒降解,避免因病毒在检测途中提前降解造成了假阴性。由于多数采样点不具备及时检测的功能,往采样管里加保存液就很关键。

除了朊病毒之外,所有微生物都是含有蛋白质和核酸的,其中病毒就是有蛋白质外壳加核糖核酸或者脱氧核糖核酸组成的结构简单的微生物,只需要检测出病毒特定的核酸序列,就能判断样本是否感染病毒。当然也可以检测病毒蛋白上特有的抗原表位来确定。

病毒检测呈阴性就是指:从患者的临床症状、肺部影响学结果甚至流行病学史都支持为新冠肺炎,但患者病毒核酸检测结果为“阴性”,检测结果与临床不符。造成假阴性的原因是多方面的,通常为如下几种情况:

①、采样部位含量过少:病毒入侵人体初期,人体内病毒量尚未达到可检测的程度。在病毒潜伏期、无症状、轻度症状、严重症状的不同时期,鼻咽部、口咽部、气管、支气管和肺泡的病毒载量会存在差异。采样时机和采样部位的不同,可能导致所采集的标本中没有足够量的病毒;

②、样本含量低于检测下限:任何检测试剂都有其检测下限(即敏感性),如果患者标本内的病毒达不到所使用试剂的检测下限,则会出现假阴性;

③、样本病毒降解:样本从采样到检测的间隔时间太长、或者样本存放环境温度过高、采样管内保存液变质等原因导致病毒提前降解,从而无法准确检出病毒。

病毒保存液分为两种:灭活型保存液主要是快速杀灭病毒,裂解病毒蛋白,释放出核酸dna或RNA,在通过PCR扩增检测出病毒特定核酸即可;另一种是非灭活型保存液,它可以完整的保护好病毒的蛋白,属于细胞培养型保存液,经用于蛋白检测,也能用于核酸检测,但由于病毒没有灭活需要防止样本交叉污染,对储存温度要求也高。

不管是灭活型病毒样本保存液还是非灭活型病毒保存液,都是可以满足于不同需求的病毒检测的,华晨阳建议广大客户在选购时根据实际情况来选择合适的保存液,毕竟实践才能出真知。

 

病毒保存液对于病毒保存及运输的重要意义

病毒保存液对于病毒保存及运输的重要意义

病毒保存液,对于很多小伙伴来时,这是个新奇的词语,殊不知它对于各种病毒的检测具有重要的意义,今年的新冠病毒把人类折磨的够呛,面对着大量的学生要投入正常的生活轨道,很多地方开始集中监测新冠病毒,在其中病毒保存液起到了很重要的作用。

目前对新型冠状病毒的检测方式主要还是对于病毒核酸的检测,而病毒保存液是一种采样管内浸没采样拭子病毒标本的一种保护病毒的被检测物质的液体,它主要适用于新型冠状病毒、手足口病毒、流感病毒等常见的病毒样本采集保存运输工作,可以用来采集咽拭子、鼻拭子或者特定部位的组织样本,储存的样本可以用于后续的核酸检测或者病毒培养等临床实验。

由于病毒属于寄生生物,采样后体外就无法存活了,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中进行保存,为了保护病毒检测环境的安全和检测人员的安全,灭活病毒保存液其实是比较好的选择。

前面已经说灭活病毒保存液可以使病毒失去活性,失去活性后是怎么来进行检测的呢?我们使用灭活型保存液的目的是裂解核酸,释放核酸然后通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,通过这种方法来判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否感染了病毒。而病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测出了病毒。通常我们在病毒采样后,样本并不是都能在样本采集处进行运输和保存的,因此我们就需要对采集到的病毒拭子进行运输和保留,不然病毒核酸会很快降解就无法检测到核酸了,所以就需要往采样管里加保存液来让病毒的核酸不要那么快被降解。

华晨阳科技非灭活病毒保存液与市场上其他厂家相比较而言,不仅添加了病毒所必须的Hank’s缓冲液来构建中性环境,还添加了牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂,可保护病毒的蛋白质外壳,使其不易分解,获得的DNA/RNA质量好,能得到较快的检测结果,可完成各种病毒检测及分析实验,如PCR、qPCR等,同时节省运输成本。

病毒采样管里面的液体有什么功能?

病毒采样管保存液中的抗菌抗生素

病毒采样管保存液是用于病毒的采样、运输保存及检测的溶液介质,添加在病毒采样管内,有灭活型和非灭活两种。其中,非灭活保存液需要添加抗菌抗生素,包括抗细菌抗生素和抗真菌抗生素。

非灭活型病毒保存液由于需要保存病毒的核酸以及蛋白膜上的抗原表位,需保留完整的病毒结构,尽量延长病毒体外存活时间,因此需要添加细菌及真菌的抗生素防止长菌对病毒造成干扰。细菌抗生素通常用的是庆大霉素,这里主要介绍几种抗真菌抗生素。

①、两性霉素b:上世纪50年代由链霉菌的培养液中分离而得到的一种多烯类光谱抗深部真菌感染的抗生素.pH在4-10时稳定,在中性或酸性介质中可形成盐,引起抗菌活性降低。它能选择性地与真菌胞浆膜上的麦角固醇相结合,在膜上形成微孔或通道,从而改变胞浆膜的通透性,导致真菌细胞内钠离子、核苷酸、氨基酸等物质外漏,正常代谢被破坏而起到抑菌的作用。

②、制霉菌:制霉菌是一种多烯型抗生素,具有共轭多烯大环内酯结构,与两性霉素结构类似,能抑制真菌和皮藓菌的活性,对细菌无抑制作用

③、灰黄霉素:能抑制真菌有丝分裂,使有丝分裂的纺锤结构断裂,终止中期细胞分裂。本品沉积在皮肤、毛发的角蛋白的前体细胞内,能促使角蛋白抵抗真菌的侵入;当感染角蛋白脱落后,代之以健康组织。对表皮藓菌属、小孢子菌属和毛藓菌属引起的皮肤真菌感染有效,对其他真菌感染包括念珠菌以及细菌无效。此外,酮康唑、特比萘芬、十一烯酸、水杨酸等药物也具有抗真菌的作用。

 

病毒采样管里面的液体有什么功能?

病毒采样管有哪些方面的要求?

病毒采样管有哪些方面的要求?

病毒采样管内搭载的都是感染性物质,一部分也是高致病性感染性物质,因此对包装容器的要求非常严格,病毒采样管必须满足三个方面的要求:

①、运输安全:

避免运输过程中样品泄漏,符合世卫组织规定及生物安全规定的采样管

②、保存的安全性:

避免样品在保存过程中泄漏,符合世卫组织规定及生物安全规定的采样管

③、样品的有效性:

采样管本身保证对样品没有毒害作用

一次性病毒采样管是一种通用的采样产品;

一次性病毒采样管是通用的采样产品,可以迅速灭活病毒,防止气溶胶传播的风险。可用于各种病毒样品、衣原体样品、解脲等离子体样品的样品,在2~8天短期储存和运输,-80℃冰箱或液氮环境中长期储存。在需要长途运输的情况下,为了保证病毒采样管的最佳运用作用,主张冷链(525)的运用

用途:

用于临床流感、禽流感、手足口病、麻疹等病毒标本何支原体、解脲支原体、衣原体等标本的收集和运输,有效灭活病毒。防止气溶胶传播感染的风险。

一次性使用病毒采样管的使用要求

病毒采样管为什么分灭活型和非灭活型?

一次性使用病毒采样管在进行标本采样后,通常标本都不能马上进行PCR检测,往往需要将采样的拭子样品进行运输,而病毒本身在体外很快就会裂解掉,这样就会影响到后续的检测,所以在保存剂运输时,就需要加入病毒保存液,病毒保存液又分为两种,一种是灭活型的,一种是非灭活型的。

为什么需要分为灭活型和非灭活型呢?由于不同的检测目的,需要选择不同的病毒保存液和采样管,而且为了满足这种不同的检测要求和不同的病毒检测实验室的条件,采样不同的病毒,病毒采样管分类是非常有必要的。

那灭活型和非灭活型又有哪些区别呢?或是说它们都能满足哪些采样的需求。

灭活型的病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解灭活型的保存液。采样时内含高浓度的胍盐即可高效灭活病毒,能有效阻止实验操作人员第二次感染,但又含有抑制剂,能保护病毒的核酸不被降解,从而使后续能通过NT-PCR进行检测。而且都能在常温下保存相对较长的时间,节省了病毒样品保存以及运输的成本。

而非灭活型病毒采样管主要是以运送培养基为基础改良的病毒维持型保存液。它能够保持病毒在体外的活性以及抗原核核酸的完整性,保护病毒蛋白质外壳不易分解,较大程度地保持了病毒样本的原始性。这种保存液除了用于核酸提取检测外,还能用于病毒的培养、分离以及抗原的检测等,但是采样后长时间保存需要保持严格低温。

这下你明白为什么病毒采样管需要分成灭活的和非灭活了吧?他们匪类后可以根据不同的情况,不同的需求去选择不同类型的病毒保存液。但是需要注意的是:不管是灭活型还是非灭活型的,在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌,保证管内没有其他微生物,致使采样后病毒分解或其他影响造成错误检测。拭子采样后,如果使用质量欠缺的采样拭子或者是病毒采样管,可能后续的检测结果会出现假阳性,因此一定要选择具有专业资质厂家生产的病毒采样管。深圳市华晨阳科技有限公司,作为一家已有10多年经验的检验标本生产厂家,具有完善的品质管控体系和万级标准的洁净车间,确保病毒采样管高品质的生产,做病毒采样管我们是专业的,值得您的信赖!